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Fast Pfu DNA 聚合酶

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更新時間:2017-01-01
訪問次數(shù):2833
廠商性質:代理商
詳情介紹

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E031-01A250U含dNTP360元
E031-01BA包裝×5含dNTP1620元
E031-02A250U不含dNTP 310元
E031-02BA包裝×5不含dNTP 1395元

 

· 制品內(nèi)容 (250 U)

Fast Pfu DNA聚合酶(5 U/μl)50 μl
dNTP 混合液 (各10 mM)250 μl
5 × Fast Pfu Buffer with Mg2+2000 μl

 

· 制品說明 
Pfu DNA聚合酶為zui常用的高保真DNA聚合酶,在需高保真的PCR反應中廣范使用,然而Pfu酶擴增靈敏度不高,延伸速度緩慢(0.5kb/分鐘)給眾多的使用者帶來了不便。針對普通Pfu酶的以上缺點,SinoBio采用分子進化技術對普通Pfu酶進行改造,制備的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高靈敏度、抗干擾能力強等特點,是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能獲得更理想的擴增結果,并大幅度縮短擴增反應時間。 

· 用 途 
用于要求保真度比較高的PCR反應,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等(參見 SinoBio 實驗方案)。 

· 產(chǎn)品特點 
高保真:具有同Pfu酶相同的保真度,為普通Taq酶的10倍。 
快速:Fast Pfu擴增速度為普通Pfu酶的數(shù)倍,72℃保溫30秒可延伸1kb以上。 
高效:以λDNA為模板,擴增長度可達12kb,能高效擴增≤6kb片段;對于人基因組DNA等復雜模板,能有效擴增出3kb特定基因片段。 
*配方的5×Buffer:使PCR擴增反應更加穩(wěn)定、靈敏、高效。 

· 質量保證 
經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶;PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,無核酸內(nèi)、外切酶污染。 

· 使用建議

Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,無3’端"A"突出, 其PCR產(chǎn)物的克隆有兩種方案:
1.PCR前引物進行5’端加磷修飾或將PCR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中(參見 Sinobio 實驗方案)。
2.將產(chǎn)物3’末端加A后再與T-Vector連接(參見 SinoBio 實驗方案)。

*由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設計引物時應適當增加引物的長度,理想的引物長度為 20-30堿基。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解, 盡量在冰上配置反應體系,并zui后加入Fast Pfu酶。。

· 相關圖片

 

· 其他說明

 

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